Study of body fluid samples using flow cytometry: Six years of experience at the Hospital Universitario San Ignacio - Pontificia Universidad Javeriana, Bogota - Colombia / Estudio de muestras de fluidos corporales utilizando citometría de flujo: seis años de experiencia en el Hospital Universitario San Ignacio - Pontificia Universidad Javeriana Bogotá, Colombia / Estudo de amostras de fluídos corporais utilizando citometria de fluxo: seis anos de experiencia no Hospital Universitário San Ignacio - Pontificia Universidad Javeriana, Bogotá, Colômbia

Abstract Flow cytometry (FCM) was implemented in 2008 at the Pontificia Universidad Javeriana and later at the Hospital Universitario San Ignacio to examine special samples of patients with hematological malignancies and solid tumors other than bone marrow and peripheral blood for diagnosis and monitoring. This study describes the main findings of special sample evaluation over a six-year period. In all, 1070 samples of body fluids from patients with benign and malignant diseases were examined by FCM. These samples were stabilized with TransFixTM and stained with six-color immunophenotyping panels. Samples included cerebrospinal fluid, bronchoalveolar lavage, pleural fluid, pericardial fluid and ascite fluid from patients with acute and chronic leukemia, myelodysplastic syndromes, lymphomas, myeloma, autoimmune diseases, immunodeficiencies and solid tumors, among others. Flow cytometry provided important information for the classification and detection of minimal numbers of tumor cells in leukemia and lymphoma cases. This work represents the first national report describing FCM implementation in special samples for diagnosis and clinical monitoring of patients with malignant and benign pathologies.

Resumen La citometría de flujo fue implementada en 2008 en la Pontificia Universidad Javeriana y posteriormente en el Hospital San Ignacio con el fin de examinar, para diagnóstico y monitoreo, muestras especiales de pacientes con malignidades hematológicas y tumores sólidos, distintos de los de médula ósea y sangre periférica. Este estudio describe los principales hallazgos de la evaluación de estas muestras especiales en un periodo de seis años. En total, se examinaron por citometría de flujo 1070 muestras de fluidos corporales de pacientes con enfermedades malignas y benignas. Estas muestras se estabilizaron con TransFix™ y teñidas con paneles inmunofenotípicos de seis colores. Las muestras incluyeron líquido cefalorraquídeo, lavado broncoalveolar, fluido pleural, fluido pericárdico y fluido ascítico, provenientes de pacientes con leucemia aguda y crónica, síndromes mielodisplásicos, linfomas, mieloma, enfermedades autoinmunes, inmunodeficiencias y tumores sólidos, entre otras enfermedades. La citometría de flujo proporcionó información importante sobre la clasificación y detección de números mínimos de células tumorales en casos de leucemia y linfoma. Este trabajo representa el primer reporte nacional que describe la implementación de citometría de flujo en muestras especiales para diagnóstico y monitoreo clínico de pacientes con patologías malignas y benignas.

Resumo A citometria de fluxo foi implementada em 2008 na Pontificia Universidad Javeriana e posteriormente no Hospital San Ignacio com a finalidade de examinar amostras especiais de pacientes com malignidades hematológicas e tumores sólidos diferentes aos de medula óssea e sangue periférico para diagnóstico e monitoramento. Este estudo descreve as principais descobertas a partir da avaliação de amostras especiais em um período de 6 anos. Se examinaram por citometria de fluxo um total de 1.070 amostras de fluídos corporais de pacientes doenças malignas e benignas. Estas amostras se estabilizaram com TransFix™ e coradas com painéis imunofenotípicos de seis cores. As amostras incluíram fluído cérebro-espinhal, lavado broncoalveolar, fluído pleural, fluído pericárdico e fluído ascético, provenientes de pacientes com leucemias aguda e crónica, síndromes mielodisplásicos, linfomas, mielomas, doenças autoimunes, imunodeficiência, e tumores sólidos, entre outras doenças. A citometria de fluxo proporcionou informações importantes sobre a classificação e detecção de um número mínimo de células tumorais nos casos de leucemia e linfomas. Este trabalho representa o primeiro relato nacional que descreve a implementação de citometria de fluxo em amostras especiais para diagnóstico e monitoramento clínico de pacientes com patologias malignas e benignas.

Déficit de factor VII Reporte de dos casos en el Servicio de Hematooncología Pediátrica del Hospital Universitario San Ignacio / Factor VII deficiency

La deficiencia del factor VII es una enfermedad hemorrágica rara, causada por la disminución o ausencia de este factor de la coagulación; menos de 200 casos se han reportado desde que se describió por primera vez en 1951. Es un trastorno autonómico recesivo que puede afectar a varios miembros de una familia. Su prevalencia es de 1:500.000 (0,5% de todos los trastornos hereditarios de la coagulación) y su distribución es igual entre los sexos. El defecto está localizado en el cromosoma 13q34. Sólo los individuos homocigotos o heterocigotos compuestos, es decir, que son portadores de dos mutaciones diferentes, presentan manifestaciones hemorrágicas. Los heterocigotos son asintomáticos. El déficit puede ser cualitativo o cuantitativo. La forma de presentación clínica es variable y la seriedad de las hemorragias no guarda relación directa con los niveles de factor VII o su actividad. El cuadro clínico puede ser muy grave y se puede presentar hemorragia intracerebral temprana, hemartrosis o manifestaciones moderadas, dadas por sangrado mucocutáneo o hemorragia tras una intervención quirúrgica; algunos casos pueden cursar asintomáticos, a pesar de valores muy bajos de factor VII. El diagnóstico se hace mediante pruebas de coagulación, al encontrar un tiempo de protrombina prolongado con un tiempo parcial de tromboplastina normal y con la posterior cuantificación de factor VII disminuido (valores normales de 70 a 130%).

Factor VII deficiency is a rare hemorrhagic disease caused by the decrease or absence of this coagulation factor; no more than 200 cases have been reported since it was first discovered in 1951. It is an autosomal recessive disorder, which may affect several members of a family. Its prevalence is 1:500,000 (0.5% of all hereditary disorders of coagulation) and its distribution is the same in both genders. The defect is located on chromosome 13q34. Only homozygous or compound heterozygous individuals have different hemorrhagic manifestations. The heterozygotes are asymptomatic. The deficit may be qualitative or quantitative. The clinical manifestations are variable and the severity of bleeding is not directly related to factor VII titers or its activity. The clinical picture may be very severe, patients could present with an early intracerebral hemorrhage, hemarthrosis or moderate findings, given by mucocutaneous bleeding or bleeding after surgery, moreover in some cases it may be asymptomatic despite very low values of factor VII. The diagnosis is made by coagulation tests to find a prolonged prothrombin time with a normal PTT and the subsequent quantification of factor VII decreased (VN 70-130%).